Adenoviiruse kiirtest-Nina sekretsioon

Mõeldud kasutamiseks:

SARS-CoV-2 nukleiinhappetesti komplekt on mõeldud COVID-19 nukleiinhappe kvalitatiivseks tuvastamiseks ninaneelu tampooniproovides, orofarüngeaalsetes tampooniproovides ja rögas. Testi tulemused annavad molekulaarse diagnoosi aluse nakkuse või kahtlustatavate patsientide jaoks ning neid ei tohiks kasutada kliinilise diagnoosimise ainsa kriteeriumina.

Materjalid:

Testimisprotseduur:

A. Proovi ettevalmistamine

Ekstraheeritud RNA on SARS-CoV-2 nukleiinhappetesti komplekti lähtematerjal.

Tähtis: iga nukleiinhappe ekstraheerimisprotseduur tuleb läbi viia samaaegselt ühe positiivse kontrolliga (40 μL, lahjendada steriilsete soolalahuste/PBS-iga soovitud mahuni) ja ühe negatiivse kontrolliga (40 μL, lahjendada steriilsete soolalahuste/PBS-iga soovitud mahuni).

Soovitatav on kasutada järgmisi kaubanduslikke nukleiinhapete ekstraheerimise komplekte: PureLinkTM Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen); Viiruse RNA minikomplekt (QIAGEN); TIANamp Hi-DNA/RNA komplekt (TIANGEN);

B. Reaktsioonisegu seadistamine

1. Kõik reaktiivid ja proovid tuleb enne kasutamist täielikult üles sulatada, täielikult segada ja tsentrifuugida korraks toatemperatuuril (ligikaudne vahemik 18–25 kraadi).

2. Valmistage ette vajalik kogus reaktsioonisegu sobiva suurusega polüpropüleenist mikrotsentrifuugi katsutisse.

3. Pipeteerige 25 µL reaktsioonisegu sobiva optilise 96-süvendiga reaktsiooniplaadi või sobiva optilise reaktsioonitoru igasse nõutavasse süvendisse.

C. Malli lisamine

1. Lisage 5 μL proovidest/positiivsest kontrollist/negatiivsest kontrollist ekstraheeritud RNA-d. Kogumaht on 30 μL.

2. Segage proovid ja kontrollid põhjalikult reaktsiooniseguga, pipeteerides üles ja alla/vorteksiga.

3. Sulgege 96-kaevu reaktsiooniplaat sobivate kaante või optilise kleepuva kilega ja reaktsioonitorud vastavate kaantega.

4. Tsentrifuugige 96-süvendiga reaktsiooniplaati mikrotiiterplaadi rootoriga tsentrifuugis 30 sekundit kiirusel ligikaudu 2500 pööret minutis.

D. Reaalajas PCR-instrumendi programmeerimine

Põhiteabe saamiseks erinevate reaalajas PCR-seadmete seadistamise ja programmeerimise kohta vaadake vastava instrumendi kasutusjuhendit. Analüüs on optimeeritud ABI7500 reaalajalise PCR-süsteemi jaoks. PCR-käik viiakse läbi tsüklitingimustega, nagu on kirjeldatud allolevas tabelis.

Määratlege fluorestsentsi detektorid

*Palun seadke instrumendi fluorestsentsi siseviide väärtuseks "Puudub", näiteks: ABI-seeria instrumentide puhul määrake "Passive Reference" väärtuseks "Puudub".

E. Andmete analüüs

Palun määrake analüüsi parameetrid ja analüüsige andmeid vastavalt vastavate instrumentide kasutusjuhendile.

Võtke näiteks ABI 7500:

Algväärtus tuleks seada vahemikku, mis välistab amplifikatsiooni varajastes tsüklites leitud taustafluorestsentsi, kuid mis ei kattu alaga, kus võimendussignaalid tõusevad taustast kõrgemale (algusväärtus: 3–10; lõppväärtus: {{2} }). Tsükli lävi (Ct) peaks olema eksponentsiaalse faasi aluses. Analüüsitulemuse automaatseks hankimiseks klõpsake "Analysis" ja lugege tuvastamise tulemust aknas "Aruanne".

Kuum tags: adenoviiruse kiirtest-nasaalne sekretsioon, Hiina, tarnijad, tootjad, tehas, lahtiselt